Il contenuto principale del libro offre uno spunto di riflessione su come affrontare i cambiamenti che avvengono nel corso della vita di ognuno di noi, attraverso tre sezioni distinte del racconto:
- "Una riunione": un gruppo di vecchi compagni di scuola si ritrova a confrontarsi su come poter affrontare al meglio i cambiamenti della vita;
- il cuore del libro è la storia "Chi ha spostato il mio formaggio?": quattro personaggi, i topolini Nasofino e Trottolino e i due piccoli gnomi Tentenna e Ridolino mettono in atto diverse strategie per trovare nel Labirinto (metafora dei luoghi di vita quotidiana: il posto di lavoro, la famiglia, comunità che frequentiamo) il "formaggio" ovvero la metafora di ciò che ognuno di noi desidera dalla vita...
- la terza parte è una sorta di discussione in cui alcune persone danno una propria interpretazione della storia e quali insegnamenti hanno ricavato dalle avventure dei topolini e dei due gnometti.